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Gibco胎牛血清的作用和操作步骤介绍

更新时间:2020-01-09      浏览次数:1761
   Gibco胎牛血清是细胞培养中用量大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。
  1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
  2. 提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
  3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
  4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
  5.起酸碱度缓冲液作用。
  6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
  Gibco胎牛血清操作步骤:
  血清通常在细胞培养中作为基础生长培养基的添加剂。常用血清是胎牛血清(FBS),也称FCS。胎牛血清是从适合人类卫生习惯的农场收集的。有时,也可能用其他的牛血清,如新生牛血清或者供体牛血清。在细胞培养中,血清供应了丰富的高分子蛋白,低分子量营养物,疏水载体蛋白和其他体外细胞生长必要的成分如激素和粘附因子。同时,血清可以增加培养基的缓冲能力或中和有毒成分,起到保护细胞的作用。在细胞培养过程中是否选择添加血清,主要根据基础培养基化学成分,培养细胞的类型和培养体系而定。
  1、采集
  在胎牛血清生产过程中,全血使用无菌一次性塑料袋收集,待凝结后分离,收集和冷冻储存血清。控制胎牛血清的初始收集是控制终血清产品质量的关键因素。只有初始原料符合我们的规范时才能允许生产。
  2、血清原料
  在市场存在两个胎牛血清标准:美国农业部标准(USDA)和欧洲标准。美国农业部标准,原始血清必须采自未发生疯牛病(BSE)和口蹄疫(FMD)疫情的国家,才可自由进口到任何国家,用于安全生产。而且研究者只有使用符合这种标准的血清,才被允许将其细胞和细胞产品送至其他同样有严格进口条款的国家,进行合作交流。
  3、处理过程
  优选数个批次冻存血清进行解冻,检验其内毒素和血红素的含量,满足标准的才能在冷藏条件下充分混合继续加工,进一步进行过滤除菌。NQBB依次通过预过滤和膜过滤来处理胎牛血清。后的过滤步骤为连续三次用100nm的滤膜过滤。过滤结束,血清采用无菌工艺进行分装,整个过程有效确保终产品无菌。血清生产的空气洁净度为100级。所有分装工作台都通过高效微粒空气过滤器过滤,并保持正压分装环境,对总微粒、悬浮微粒数和压力进行监控。分装后,终产品迅速-20度冻存,并隔离,直到所有的质量控制检测完成。
  4、FBS质量控制
  每批胎牛血清检测确认符合各项标准,并以书面的方式记录在质检报告中。
  5、质量保证
  胎牛血清生产过程在一个严格控制的条件下进行。紫外线灭菌,过滤除菌和分装是关键生产环节,可以确保血清的品质。与血清生产相关的数据作为专门的档案记录,从初步采集的原料到成品储存的整个生产过程,以及质量控制检测和结果都有备案,并可以在监控条件下追溯源文件。 胎牛血清生产过程遵循欧洲议会关于体外诊断的标准。
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