ELISA试剂盒重点：​ELISA试验中缓冲溶液等试剂的配方

ELISA试剂盒重点：​ELISA试验中缓冲溶液等试剂的配方

ELISA试验中是以抗原和抗体的免疫反应为根底，ELISA试剂以及各种溶液如何装备?上海晶抗技术教师将ELISA试验，各种ELISA装备办法汇总如下：
(1)ELISA试验包被缓冲液
(2)ELISA试验洗刷缓冲液
(3)ELISA试验稀释液;
(4)ELISA试验停止液
(5)ELISA底物缓冲液
(6)ELISA试验TMB(四甲基联苯胺)运用液
(7)规范品稀释液。
试剂配方：
a, ELISA底物缓冲液(PH5.0磷酸棗柠檬酸):
0.2M Na2HPO4(28.4克/L)              25.7ml
0.1M 柠檬酸(19.2克/L) 24.3ml
加蒸馏水50ml。
b, ELISA试验TMB(四甲基联苯胺)运用液:
TMB(10mg/5ml无水乙醇)   0.5ml
底物缓冲液(PH5.5)   10ml
0.75%H2O2                           32μl
c,规范品稀释液：
PBS 1L配方pH7.2-7.4.浓度0.01mol/L：
磷酸二氢钾(KH2PO4)：0.27g，
磷酸氢二钠(Na2HPO4)：1.42g，
氯化钠(NaCl)：8g，
KCl 0.2g，
加去离子水约800mL充沛拌和溶解，然后参加浓盐酸或许氢氧化钠调pH至7.2-7.4，zui终定容到1L.浓度为10mmol/L
d,ELISA试验包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液):
NaHCO3    1.59克
NaHCO3 2.93克
加蒸馏水至1000ml
e, ELISA试验洗刷缓冲液(PH7.4 PBS)：0.15M
KH2PO4   0.2克
Na2HPO4·12H2O 2.9克
NaCl   8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05%  0.5ml
加蒸馏水至1000ml
f, ELISA试验稀释液：
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗刷缓冲液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清与洗刷液配成5～10%运用。
g, ELISA试验停止液(2M H2SO4)：
蒸馏水178.3ml，逐滴参加浓硫酸(98%)21.7ml。
h,ELISA试验封闭液：
牛血清白蛋白(BSA) 5克
加洗刷缓冲液至100ml。
值得一提的是有的封闭液中含有脱脂奶粉，不适合长期保存。为了确保ELISA试验的准确性，试验操作中参加的缓冲液和各组分一定要准确，将洗刷液参加酶标板中的时分避免参加的试剂混入另外一个酶标孔，谨防穿插污染。