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鸡传染性法氏囊病毒抗体(IBDV Ab)试剂盒(ELISA)检测说明书

更新时间:2022-05-24      浏览次数:1225

鸡传染性法氏囊病毒抗体(IBDV Ab)试剂盒(ELISA)检测说明书

原理:

试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被鸡传染性法氏囊病毒抗体(IBDV Ab)捕获抗原的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的鸡传染性法氏囊病毒抗体(IBDV Ab)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

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操作步骤

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3.  样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

4.  除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

 检测范围:6.25 ng/mL~ 200 ng/mL。

需要而未提供的试剂和器材

1. 酶标仪(450nm)

2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒温箱

4. 蒸馏水或去离子水

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