小鼠免疫球蛋白ELISA检测试剂盒操作步骤

小鼠免疫球蛋白ELISA检测试剂盒操作步骤
样本处理及要求：

1.  血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过一夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.  血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3.  组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。zui后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

4.  细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

有以下操作技巧：

A、加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

B、合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。

C、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。

D、要尽量做双孔实验，这样才既能保证数据的准确性，又能反映出试剂盒的精密度。

E、样品稀释液应用加液器加注，并经常校对其准确性。

小鼠免疫球蛋白ELISA检测试剂盒操作步骤
储存条件和试剂盒准备：

1）有效期内的试剂如开封后未用完，请2-8°C 保存。

2）过期的试剂请不要用，打开后的试剂2-8°C 保存。

3）酶标包被板必须2-8°C 保存，如有未用完的酶标包被板，打开的铝箔袋须密封并2-8°C 保存。

4）试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。