Gibco胎牛血清在包装之前要做哪些检测和处理呢?
1、内毒素检测
内毒素,又叫脂多糖(LPS)或脂寡糖(LOS),存在于革兰氏阴性菌的细胞外膜。临床上,内毒素作为一些革兰氏阴性菌的诊断提示,如脑膜炎球菌。动物体内,内毒素能够导致发热或者诱导炎症反应;细胞培养中,内毒素能够诱导细胞反应异常。通常,采用鲎阿米巴样细胞裂解实验(LAL检测)检测内毒素水平。LAL是从美洲鲎的血液中制备的,对内毒素非常灵敏,在微量内毒素存在情况下就凝结。阿米巴样细胞相当于哺乳动物的白细胞。
2、热钝化
Gibco胎牛血清的常规处理方式是热钝化,即放在56°水浴30分钟;其目的是使血清中的补体成分及一些未知的细胞生长抑制分子失活。
与胎牛血清的其它加工方式一样,热钝化处理过程必须小心谨慎,因为血清中的生长因子容易在较高温度或者较长时间加热条件下失活,甚至产生沉淀。
3、活性炭处理
活性炭能够结合脂溶性分子,因此能够用来除去激素类物质,例如,胎牛血清中的雌二醇、孕酮、皮质醇、睾酮及T3和T4分子。血清中这些脂类激素能够干扰免疫检测及胰岛素检测方法。
4、透析处理
透析处理能够除去胎牛血清中所有分子量小于10,000Da的分子。例如,激素、细胞因子、葡萄糖、氨基酸还有许多其它分子,都能够被除去。透析也能除去胎牛血清中的抗生素及其它内源分子。
5、gamma照射
Gamma照射能够对Gibco胎牛血清进行灭菌处理。胎牛血清常规的灭菌方法是多次透过0.1um的滤膜以消除微生物污染,而gamma照射能够钝化牛群中常见的病毒。但是,一些类型的病毒能够抵抗gamma照射,比如细小病毒。